研究发现，人脐带间充质干细胞来源外泌体可以有效促进脊髓损伤的神经修复。

探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体是否可以通过促进小胶质细胞向M2型极化减轻神经炎症促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复。

将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和外泌体组（n=16），采用改良Allen法建立大鼠脊髓损伤模型。外泌体组在损伤后24 h通过神经内镜鞘内注射20 μL人脐带间充质干细胞来源外泌体。在造模后3，7，14，21 d，采用BBB评分法结合Rivlin斜板实验评估大鼠后肢运动功能的恢复情况，采用苏木精-伊红染色和尼氏染色检测脊髓组织损伤情况，Western blot检测脊髓组织中脑源性神经营养因子和血管内皮生长因子A蛋白表达水平，免疫荧光法检测脊髓组织中M1型标志物（诱导型一氧化氮合酶）与M2型标志物（精氨酸酶1）的表达比例，qRT-PCR和Western blot检测脊髓组织中诱导型一氧化氮合酶与精氨酸酶1的表达水平，ELISA法检测脊髓组织中促炎因子（肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6）和抑炎因子（白细胞介素10）水平。

①术后3，7，14 d，外泌体组BBB评分均高于模型组（P < 0.05），术后7，14 d时外泌体组Rivlin斜板实验角度均显著高于模型组（P < 0.05），苏木精-伊红染色和尼氏染色结果显示外泌体组相比于模型组脊髓组织的神经损伤减轻，术后7 d时外泌体组脑源性神经营养因子和血管内皮生长因子A表达较模型组增加（P < 0.05）；②免疫荧光实验结果显示，与模型组相比，外泌体组术后第7天病变区域的诱导型一氧化氮合酶阳性小胶质细胞明显减少，而精氨酸酶1阳性小胶质细胞明显增多（P < 0.05）；qRT-PCR和Western blot也证实了免疫荧光实验结果；③外泌体组脊髓组织中促炎因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6分泌量较模型组减少（P < 0.05），而抑炎因子白细胞介素10分泌量较模型组增加（P < 0.05）。结果表明：人脐带间充质干细胞来源外泌体可以促进小胶质细胞M1型向M2型极化，减少了促炎因子的释放，从而减轻脊髓损伤中神经炎症的继发性损害。

长链非编码RNA（LncRNA）在神经系统发育及神经性疾病中扮演着重要角色，课题组前期研究证明了缺血缺氧环境下过表达促红细胞生成素的人脐带间充质干细胞（EPO-MSCs）具有更好的神经保护功能，且显著激活了LncRNA XIST的表达。研究表明XIST与缺血缺氧脑病的发病机制有关，但其受EPO-MSCs调控进而保护缺血缺氧神经元的作用和机制尚不清楚。

探讨LncRNA XIST响应EPO-MSCs信号对缺血缺氧SH-SY5Y细胞凋亡影响的新机制。

①通过慢病毒转染构建敲低LncRNA XIST（sh-XIST）和阴性对照（NC-XIST）SH-SY5Y细胞株，采用氧-葡萄糖剥夺诱导细胞缺氧缺血损伤，使用Transwell小室构建EPO-MSCs和sh-XIST、NC-XIST缺血缺氧SH-SY5Y细胞非接触共培养体系，使用CCK-8方法检测SH-SY5Y细胞的增殖能力，使用细胞划痕实验检测SH-SY5Y细胞的迁移能力，使用流式细胞仪检测SH-SY5Y细胞凋亡情况。②RNA-seq生信分析筛选sh-XIST与NC-XIST细胞株差异表达基因和通路，利用双荧光素酶实验验证miR-124-3p与靶基因XIST和GRIN1之间的关系，通过qRT-PCR验证下游miR-124-3p、GRIN1基因的表达水平。③加入miR-124-3p抑制剂和模拟物验证缺血缺氧并与EPO-MSCs共培养后SH-SY5Y的表型变化。

①与NC-XIST组相比，sh-XIST组SH-SY5Y细胞缺血缺氧损伤并与EPO-MSCs共培养后的增殖和迁移能力下降，细胞凋亡增加。②双荧光素酶实验结果显示，miR-124-3p与其靶基因XIST之间存在相互作用。在缺血缺氧条件下，转染miR-124-3p mimics的SH-SY5Y细胞在与EPO-MSCs共培养后表现出细胞凋亡减少的情况；相反，当SH-SY5Y细胞转染miR-124-3p inhibitor时，在相同的缺血缺氧条件及与EPO-MSCs共培养的情况下，细胞凋亡则显著增加。③通过对sh-XIST进行转录组测序和生物信息学分析筛选得到显著下调的神经活性配体-受体通路及中枢神经系统发育关键受体基因GRIN1。④双荧光素酶实验结果显示，miR-124-3p与GRIN1相互作用，与NC-XIST组相比，缺血缺氧后sh-XIST组SH-SY5Y细胞GRIN1表达显著下调。结果表明，LncRNA XIST通过上调miR-124-3p从而促进GRIN1表达，进而减少缺血缺氧并与EPO-MSCs共培养SH-SY5Y细胞凋亡，增强其增殖、迁移能力；sh-XIST可以阻断这一保护功能。

目前结直肠癌的治疗方法包括手术切除、化疗等，但是手术并发症多、化疗后期具有耐药性等原因都使得患者的后续生活质量不能得到提高。

综述间充质干细胞衍生外泌体治疗结直肠癌的作用机制、最新进展及目前存在的问题。

计算机检索PubMed数据库、中国知网、万方数据库收录的相关文献。英文检索词为“mesenchymal stem cells exosomes，colorectal cancer，chemotherapy，treatment”，中文检索词为“间充质干细胞外泌体，结直肠癌，化疗，治疗”，最终纳入96篇文献进行分析。

①间充质干细胞衍生外泌体主要通过自身携带的微小RNA及长链非编码RNA以介导不同的信号通路，在结直肠癌中发挥不同作用；②间充质干细胞衍生外泌体具有高稳定性、高生物相容性的特点，可作为治疗药物的优秀载体；③间充质干细胞衍生外泌体对不同种类的化疗药物的耐药性具有不同的作用。

人脱落乳牙牙髓干细胞广泛应用于组织修复再生领域，但组织再生效果在实际应用中存在局限性。利用miRNA干预人脱落乳牙牙髓干细胞的定向分化是未来组织修复再生的重要发展方向。

探讨miR-26b对乳牙牙髓干细胞成神经及成血管分化能力的影响。

从人脱落乳牙中分离提取乳牙牙髓干细胞，并将其向神经及血管方向诱导分化，分别检测成神经标志物Nestin、NSE、βⅢ- Tubulin和成血管标志物CD31、VEGFR2、ANG-1及miR-26b的表达。然后将乳牙牙髓干细胞分为空白对照组、miR-26过表达组和阴性对照组，RT-qPCR、细胞免疫荧光染色及Western blot检测各组乳牙牙髓干细胞成神经及成血管诱导后相关标志物的表达变化。

①乳牙牙髓干细胞具有多向分化潜能，能向成骨、成脂、成神经及成血管方向分化；②在乳牙牙髓干细胞成神经及成血管分化过程中miR-26b表达水平升高；③相较于空白对照组和阴性对照组，miR-26b过表达组乳牙牙髓干细胞成神经相关基因βⅢ-Tubulin、Nestin、NSE及成血管相关基因CD31、VEGFR2、ANG-1的mRNA表达显著升高（P < 0.01），βⅢ-Tubulin、Nestin及CD31、VEGFR2蛋白表达显著升高（P < 0.01）。以上结果表明，miR-26b过表达能促进人脱落乳牙牙髓干细胞成神经和成血管诱导分化。

前期研究发现生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45β（Gadd45b）有益于急性脑缺血损伤修复，但其对于慢性脑缺血的作用机制仍不明确。

探讨Gadd45b对慢性脑缺血大鼠脑白质脱髓鞘病变的影响及机制。

将SD大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、空载体组、Gadd45b过表达组，每组15只。在大鼠脑双侧海马和双侧脑室注射空载慢病毒、Gadd45b过表达慢病毒，慢病毒转染1周后采用双侧颈总动脉结扎法制备慢性低灌注脑缺血大鼠模型。双侧颈总动脉结扎3周后进行新物体识别实验评估大鼠学习认知功能，固蓝髓鞘染色观察大鼠胼胝体部位髓鞘结构变化，苏木精-伊红染色、尼氏染色观察大鼠脑组织胼胝体区损伤情况，免疫荧光染色检测大鼠脑胼胝体区髓鞘碱性蛋白、神经丝蛋白200的表达，免疫荧光双标染色检测大鼠脑组织中星形胶质细胞标记物GFAP/C3d，GFAP/S100A10的表达，ELISA检测脑组织上清液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平。

①Gadd45b过表达显著改善慢性脑缺血大鼠的学习认知功能，以及改善大鼠胼胝体区脱髓鞘病变以及病理损伤；②免疫荧光结果发现Gadd45b过表达显著增加慢性脑缺血大鼠脑组织髓鞘碱性蛋白、神经丝蛋白200的表达水平；③Gadd45b过表达使慢性脑缺血大鼠脑组织中GFAP/C3d双阳性细胞减少，GFAP/S100A10双阳性细胞增加；④Gadd45b过表达降低了慢性脑缺血大鼠脑组织中肿瘤坏死因子α，白细胞介素6水平。结果表明：Gadd45b过表达通过促进星形胶质细胞A2表型转化，减轻慢性脑缺血大鼠脑白质髓鞘结构损伤，减缓神经炎症，从而改善认知功能障碍。

长链非编码RNA TP53TG1（lncRNA TP53TG1）参与调控多种癌症细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡，但在其他细胞中的作用报道甚少。

探讨lncRNA TP53TG1对人根尖牙乳头干细胞增殖和分化的影响及途径。

分离、培养人根尖牙乳头干细胞，转染lncRNA TP53TG1过表达慢病毒，RT-qPCR检测lncRNA TP53TG1的过表达效率，Western blot检测PI3K、AKT、ERK、P38、Smad3及其磷酸化蛋白的相对表达量。将人根尖牙乳头干细胞分为慢病毒空载体组和过表达lncRNA TP53TG1组，采用CCK-8法检测细胞增殖情况；成骨诱导第5天采用碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶活性，成骨诱导第21天采用茜素红染色检测矿化结节形成情况；成骨诱导第3，7，14天采用RT-qPCR检测牙本质涎磷蛋白、Runt相关转录因子2、牙本质基质蛋白1、骨涎蛋白的mRNA表达水平；成骨诱导第3，7，14天采用Western blot检测牙本质涎磷蛋白和Runt相关转录因子2的蛋白表达水平。

①RT-qPCR检测结果显示慢病毒成功整合到根尖牙乳头干细胞基因组中，Western blot检测结果显示，过表达lncRNA TP53TG1上调了p-PI3K、p-AKT的蛋白水平而不影响其他通路磷酸化蛋白的表达；②从细胞培养第3天开始，过表达lncRNA TP53TG1显著促进根尖牙乳头干细胞的增殖；③在诱导根尖牙乳头干细胞牙源性分化过程中，过表达lncRNA TP53TG1促进成牙本质及成骨分化相关基因和蛋白的表达，碱性磷酸酶活性和矿化结节形成显著增加；④结果表明：lncRNA TP53TG1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进根尖牙乳头干细胞成牙本质及成骨分化。

头颈部肿瘤放射治疗极易引起口干症，严重影响患者的生活质量，近年来工程化干细胞及其旁分泌因子在唾液腺损伤修复中表现出治疗潜力，但目前尚无人羊膜间充质干细胞来源外泌体应用于放射性唾液腺损伤的相关实验研究。

初步探讨人羊膜间充质干细胞来源外泌体对放射性颌下腺损伤的修复作用。

超滤法+超速离心法提取人羊膜间充质干细胞外泌体并鉴定。将SD大鼠随机分为对照组、放射损伤组、放射损伤+外泌体组，通过18 Gy辐射大鼠颌下腺组织构建放射性颌下腺损伤大鼠模型，放射建模后1 d通过颌下腺原位注射人羊膜间充质来源外泌体，于1，3，7，14 d取样，检测各组大鼠静息唾液流速；苏木精-伊红染色观察颌下腺组织结构；糖原染色观察颌下腺组织中糖原颗粒表达；Masson染色观察颌下腺组织纤维化；酶联免疫吸附法检测分泌唾液淀粉酶含量；免疫荧光染色观察颌下腺组织中水通道蛋白、紧密连接蛋白表达；实时荧光定量PCR检测颌下腺组织中水通道蛋白、唾液淀粉酶基因的相对表达量；原位末端标记法检测各组颌下腺组织中的细胞凋亡率。

放射造模后，与放射损伤组相比：①苏木精-伊红染色结果显示放射损伤+外泌体组颌下腺组织结构恢复，核仁增多，腺泡数目增多、腺泡萎缩改善；②糖原染色结果显示，放射损伤+外泌体组腺泡胞浆中阳性酶原颗粒数量、密度逐渐增多；③Masson染色结果显示，放射损伤+外泌体组间质及导管周围阳性胶原纤维数量、密度逐渐减少，纤维化程度缩小，胶原沉积减弱；④放射损伤+外泌体组唾液流速升高（P < 0.05）；水通道蛋白5荧光强度增强（P < 0.05）且基因表达量显著增强（P < 0.01）；紧密连接蛋白荧光4分布减弱，且荧光强度下降（P < 0.05，P < 0.01），唾液淀粉酶含量升高（P < 0.05）且基因表达量显著升高（P < 0.01），阳性凋亡细胞减少（P < 0.05，P < 0.01）。结果表明人羊膜间充质干细胞来源外泌体局部注射后短时期内可改善颌下腺组织病理形态、促进唾液流速及淀粉酶表达，并可能通过抑制腺泡凋亡对大鼠放射性颌下腺损伤起到功能修复的作用。

间充质干细胞诱导的成肝细胞样细胞是很有前途的肝再生或肝脏组织工程的种子细胞，传统的二维培养成肝诱导效率低下，越来越多的研究集中在三维培养诱导成肝分化上。

总结间充质干细胞成肝诱导的三维培养模型，重点讨论间充质干细胞成肝分化的表观遗传学调控机制研究进展，为提高间充质干细胞成肝分化的效率提供理论依据。

检索PubMed数据库及中国知网等数据库收录的相关文献，英文检索词为“mesenchymal stem cells，3D culture，hepatogenic differentiation，hepatocyte-like cells，epigenetics”，中文检索词为“间充质干细胞，三维培养，成肝分化，肝细胞样细胞，表观遗传学”，并结合文献溯源法查找部分文献进行综述分析。

①目前常见的间充质干细胞成肝分化的三维培养模型包括细胞球、生物支架、生物打印、微流控芯片等，它们在诱导成肝分化过程中各有优势和不足；②间充质干细胞成肝分化过程中表观遗传学调控起到关键作用，主要涉及组蛋白修饰、DNA甲基化、非编码RNA的调控等，不同的表观遗传修饰和机制相互作用，共同调节间充质干细胞成肝分化；③在三维培养条件下诱导间充质干细胞成肝分化过程中，表观遗传学修饰尤其是组蛋白乙酰化发挥了重要作用。未来，需要结合表观遗传学优化三维培养策略，提高成肝诱导效率。

骨髓间充质干细胞是骨形成的主要效应细胞，随着年龄的增加，骨髓间充质干细胞的再生能力减弱、分化功能受损，导致骨质疏松。因此，恢复老龄骨髓间充质干细胞的再生能力和细胞功能对骨质疏松的有效治疗至关重要。

探究年轻大鼠第3，11代骨髓间充质干细胞来源外泌体对老年大鼠骨髓间充质干细胞衰老的影响。

分离培养6-8周龄雌性SD大鼠骨髓间充质干细胞，分别传代至第3代和第11代，随后提取第3，11代骨髓间充质干细胞来源外泌体。分离培养18月龄雌性SD大鼠骨髓间充质干细胞，传代至第3代，分为3组：对照组为常规培养，其他2组用第3，11代骨髓间充质干细胞来源外泌体干预。外泌体干预48 h后，利用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞核内β-半乳糖苷酶的表达，qRT-PCR检测衰老相关基因的表达。通过Small RNA测序，比较第3，11代骨髓间充质干细胞来源外泌体内miRNA的表达差异。

①与对照组和第11代骨髓间充质干细胞来源外泌体组相比，第3代骨髓间充质干细胞来源外泌体组老龄大鼠骨髓间充质干细胞的β-半乳糖苷酶活性显著降低；②与对照组相比，第3代骨髓间充质干细胞来源外泌体组衰老相关基因p21和p16的表达显著降低（P < 0.05），而第11代骨髓间充质干细胞来源外泌体组衰老相关基因p21和p16的表达无显著差异；③测序结果表明，两种外泌体内miRNA的表达存在显著差异，其中表达差异最显著的miRNA是let-7c-5p、let-7b-5p、miR-320-3p和miR-26a-5p，KEGG分析结果显示显著性差异miRNA富集通路包含mTOR、AMPK等衰老相关信号通路。上述结果表明，第3代骨髓间充质干细胞来源外泌体具有逆转老龄大鼠骨髓间充质干细胞衰老的能力。

骨关节炎是一种以软骨基质持续性破坏为特征的退行性关节病，目前仍无有效的药物治疗方案，二甲双胍预处理骨髓间充质干细胞来源外泌体因避免了口服药物不良反应及免疫原性等特点，可能成为治疗骨关节炎的新方法。

探讨二甲双胍预处理骨髓间充质干细胞来源外泌体对软骨细胞的调节作用。

体外培养乳兔骨髓间充质干细胞和软骨细胞。使用超速离心法收集正常骨髓间充质干细胞源性外泌体和经过二甲双胍预处理的骨髓间充质干细胞源性外泌体，分别用含外泌体的培养基培养软骨细胞24 h，再用100 μmol/L H₂O₂干预24 h。采用CCK-8法和划痕愈合实验检测软骨细胞增殖和迁移能力变化；采用Western blot和RT-qPCR检测软骨细胞中Ⅱ型胶原、P16蛋白及mRNA的表达变化，以及采用Western blot检测MKK7/JNK通路蛋白的表达变化；使用ELISA试剂盒检测软骨细胞中超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平。

①在氧化应激环境下，软骨细胞的增殖和迁移能力减弱，两种外泌体能够一定程度恢复软骨细胞的增殖和迁移能力，二甲双胍预处理骨髓间充质干细胞来源外泌体的改善效果更显著（P < 0.05）；②与正常骨髓间充质干细胞来源外泌体相比，二甲双胍预处理骨髓间充质干细胞来源外泌体更能有效提高Ⅱ型胶原表达和超氧化物歧化酶活性（P < 0.05），同时也更能有效降低P16表达和丙二醛水平（P < 0.05）；③两种外泌体能够一定程度抑制MKK7和p-JNK蛋白表达，二甲双胍预处理骨髓间充质干细胞来源外泌体的抑制效果更显著（P < 0.05）。结果表明，在氧化应激环境下，二甲双胍预处理骨髓间充质干细胞来源外泌体通过抑制MKK7/JNK通路对抗软骨细胞衰老并促进软骨细胞增殖。